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Un paramètre important est la dimension de la plaie, qui est surveillée par des stratégies de mise à l'échelle des mesures ou par des images. De plus, la coloration et l'humidité des plaies sont décrites. L'intensité de la douleur ressentie par les patients constitue une autre méthode d'évaluation.
Après le retrait des témoins et des échantillons, les cellules ont été observées en contraste de coupe afin d'évaluer leur densité et leur morphologie. Elles ont ensuite été colorées au violet de cristal à 0,2 % pendant 20 minutes à température ambiante, puis lavées. La couverture cellulaire sur la plaque et la morphologie cellulaire ont été enregistrées.
Par conséquent, les deux types d'écouvillons indicateurs peuvent être évalués visuellement grâce à leur changement de couleur du vert au rouge lorsque le pH augmente. Pour cette analyse, les écouvillons indicateurs ont été placés dans des solutions tampons phosphate de différents pH et les variations de couleur ont été enregistrées par photographie numérique. Les cellules MRC-5 ont été ensemencées à une densité de 300 000/puits dans des plaques à 6 puits 24 h avant l'expérience afin d'obtenir la confluence. Pour l'analyse des écouvillons en contact direct avec les cellules, les cellules ont été exposées à deux écouvillons/puits afin de couvrir environ 1/7 de la zone de croissance. Une feuille de cuivre (Glas-per-Klick, Berlin, Allemagne) a servi de témoin positif et une feuille de PVC de témoin négatif.
Lors d'un procédé d'immobilisation classique, 50 mg de GJM-492 ou de GJM-503 ont été traités avec 0,5 g d'acide sulfurique concentré pendant 30 minutes à température ambiante. Le groupe 2-hydroxyéthylsulfonyle du colorant indicateur correspondant a ainsi été transformé en sulfonate. Le mélange a ensuite été versé dans 360 ml d'eau distillée et neutralisé avec 1,0 ml d'une solution d'hydroxyde de sodium à 30 %. À ce stade, 40 mg du colorant inerte RBBR dans 40 ml d'eau ont été ajoutés, suivis de 12,5 g de carbonate de sodium dans 100 ml d'eau et de 2,5 ml d'une solution d'hydroxyde de sodium à 30 %.
Après ajout d'hydroxyde de sodium et de carbonate de sodium, les sulfonates colorants ont été transformés en dérivés vinylsulfonyles et appariés aux groupes hydroxyles de la cellulose par addition de Michael. Après 30 minutes, les cotons-tiges colorés ont été retirés du bain de teinture et lavés abondamment à l'eau distillée jusqu'à l'obtention d'une couleur verte, indiquant l'élimination totale du milieu de réaction alcalin. La combinaison de GJM-492 et de RBBR a donné les cotons-tiges indicateurs de type 1, tandis que le mélange de GJM-503 et de RBBR a donné les cotons-tiges indicateurs de type 2. Les cotons-tiges stériles (référence 6100/SG/CS), d'une longueur de 150 mm, dotés d'une tige en plastique et d'une tête en rayonne, provenaient de Nuova Aptaca SRL. Actuellement, l'analyse des plaies est une question qualitative plutôt que quantitative ; par conséquent, l'effet du traitement local sur la cicatrisation n'est pas bien quantifié.
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