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Tuttavia, la maggior parte dei test per gli oppioidi non rileva in modo affidabile ossicodone, ossimorfone, meperidina o fentanil. Allo stesso modo, la maggior parte dei test antidroga per le benzodiazepine non rileva in modo affidabile il lorazepam. Tuttavia, sono spesso disponibili test antidroga sulle urine che rilevano una droga specifica, piuttosto che un'intera classe. Il test antidroga sulle urine è un immunodosaggio basato sul principio del legame aggressivo.

Se tale controllo non viene richiesto specificamente, il controllo di base aggiuntivo rileverà la maggior parte dei farmaci di una classe, ma il datore di lavoro o il medico non saranno lieti di identificare il farmaco. Un errore comune è che un test antidroga che analizza una categoria di farmaci, ad esempio gli oppioidi, rilevi tutti i farmaci di quella classe.

Il campione di urina segue una specifica "catena di custodia" per garantire che non venga manomesso o invalidato a causa di errori di laboratorio o del dipendente. L'urina del paziente o del dipendente viene raccolta in un luogo remoto in un contenitore sicuro appositamente progettato, sigillato con nastro adesivo antimanomissione e inviato a un laboratorio di analisi per essere analizzato per la presenza di farmaci. Il primo passaggio sul sito di analisi consiste nel dividere l'urina in due aliquote. Un'aliquota viene prima analizzata per la presenza di farmaci utilizzando un analizzatore che esegue un test immunoenzimatico come test di screening iniziale. Per garantire l'integrità del campione e rilevare eventuali adulteranti, altri parametri come creatinina urinaria, pH e densità relativa vengono analizzati insieme a questo test iniziale.

Se il risultato delle urine è positivo, si utilizza un'altra aliquota del campione per confermare i risultati mediante cromatografia a gas - spettrometria di massa (GC-MS) o cromatografia liquida - spettrometria di massa. Se richiesto dal medico o dal datore di lavoro, vengono effettuati screening individuali per alcuni farmaci; si tratta in genere di farmaci appartenenti a una classe chimica che, per una o più ragioni, sono considerati più inclini all'abuso o fonte di preoccupazione. Ad esempio, possono essere analizzati ossicodone e diamorfina, entrambi analgesici sedativi.

Un farmaco, se presente nel campione di urina al di sotto del suo punto di cut-off, non saturerà i siti di legame del suo specifico anticorpo. L'anticorpo reagirà quindi con il coniugato farmaco-proteina e comparirà una linea colorata visibile nell'area della linea di test della striscia di farmaco specifica.

I farmaci eventualmente presenti nel campione di urina competono con il rispettivo coniugato per i siti di legame sul loro specifico anticorpo. Durante il test, un campione di urina migra verso l'alto per capillarità.