Cotonete de microespuma com cabeça de alta precisão

Embora a maioria dos testes, de saliva ou não, seja analisada usando estratégias baseadas em PCR, existem outras opções alternativas promissoras, como a amplificação isotérmica mediada por alça, que também recebeu Autorização de Uso Emergencial para testes usando swabs nasofaríngeos. Os Estados Unidos têm lutado para implementar testes consistentes e generalizados durante a pandemia, dificultando o rastreamento da disseminação do vírus pelas autoridades de saúde pública. Além disso, os equipamentos e reagentes necessários para realizar os testes de PCR frequentemente se esgotam, desde os swabs necessários para coletar a amostra até os reagentes que extraem o RNA viral. Amostras de controle coletadas corretamente ajudarão a descartar contaminação externa da amostra superficial.

Para todos os valores medidos nas seções acima e subsequentes, discutimos com a Tabela 1. As amostras de biópsia de mucosa foram coletadas com um videoendoscópio versátil e uma pinça de biópsia versátil (Wilson-Cook; European Endoscopy Group, Fujinon Medical Holland, Veenendaal, Holanda). As amostras de biópsia de mucosa foram colhidas do cólon sigmoide a 20–30 cm da borda anal. Por tópico, um padrão de mucosa foi lavado duas vezes em 500 µl de PBS antes do congelamento rápido em nitrogênio líquido e um segundo padrão foi depositado em um recipiente cheio de 500 µl de PBS e congelado rapidamente em nitrogênio líquido. No grupo colonoscopia, os swabs retais foram coletados no momento da colonoscopia, imediatamente antes do processo endoscópico.

Por fim, como constatamos que os perfis da microbiota do swab retal eram distintos dos perfis da microbiota da mucosa e fecal no grupo da colonoscopia, nos interessamos pela similaridade entre a microbiota fecal e a microbiota da mucosa. Descobrimos que as correlações entre as amostras fecais e as biópsias da mucosa foram tão pequenas quanto as correlações das amostras do swab com cada um desses tipos de padrão.

O volume mínimo de água a ser coletado deve ser suficiente para completar todos os ensaios indicados; 100 mL é considerado um volume mínimo adequado. Postagens no Facebook compartilhadas centenas de vezes afirmam que a pandemia de coronavírus é um disfarce para um esforço financiado pela Fundação Gates para implantar microchips quando o nariz ou a garganta dos pacientes são coletados durante os testes de COVID-19. Isso é falso; a pandemia é real, a fundação negou a alegação e os especialistas dizem que há uma causa médica para a forma como os cotonetes são usados ​​nos testes para a doença. Cotonetes retais, amostras fecais e biópsias de mucosa podem, às vezes, ser muito semelhantes, mas, no geral, esses três tipos de amostras parecem abrigar microbiotas mais ou menos distintas.

Isso confirmou que os swabs autocoletados apresentaram alta correspondência com os swabs coletados clinicamente quando armazenados da mesma forma. Para avaliar o impacto de um protocolo de armazenamento de padrão não rigoroso, comparamos os perfis da microbiota de swabs retais congelados rapidamente com os perfis de swabs retais que foram armazenados em temperatura ambiente em RTF por 2 horas antes do congelamento a -20 °C. Como as condições de armazenamento podem afetar bactérias Gram-positivas e Gram-negativas de forma diferente, analisamos os dados separadamente para AFFV e Bacteroidetes. Correlações foram calculadas para perfis derivados de amostras de swabs congelados rapidamente versus os perfis médios de amostras de swabs duplicadas armazenadas em RTF em temperatura ambiente antes do congelamento. Para AFFV e Bacteroidetes, as comparações intraindividuais mostraram altas similaridades, medidas por um alto R² mediano.

Novamente, uma correlação melhor foi encontrada para Bacteroidetes do que para AFFV. Para verificar se a autocoleta domiciliar pelos pacientes produziria resultados comparáveis ​​aos swabs coletados no ambulatório, comparamos esses resultados em dez indivíduos. Novamente, os perfis foram comparados em pares e os resultados foram analisados ​​separadamente para AFFV e Bacteroidetes. Essa análise também mostrou altas correlações intra-sujeito e baixas correlações intersujeito.

Ao contrário dos testes de coliformes em água potável, a amostragem de água para auxiliar investigações epidemiológicas de surtos de doenças pode estar sujeita a modificações determinadas pelas circunstâncias presentes na instalação. As estratégias de ensaio para patógenos transmitidos pela água também podem não ser padronizadas. Portanto, amostras de controle ou de comparação devem ser incluídas no delineamento experimental. Qualquer desvio de uma técnica padrão deve ser totalmente documentado e deve ser considerado na interpretação dos resultados e nas estratégias de cultivo. Se a água contiver níveis elevados de metais pesados, um agente quelante deve ser adicionado à amostra.

Swabs retais foram inseridos no canal anal, além da borda anal (±3 cm). Dois swabs retais foram depositados em um recipiente com 500 µl de tampão de Fluido de Transporte Reduzido e armazenados em temperatura ambiente por duas horas antes do armazenamento a -20°C.